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    PCR系統注意事項搶先知
  • 發布日期:2020-07-02      瀏覽次數:721
    •   熒光定量PCR系統是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每一個循環變得“可見”,后通過Ct值和標準曲線對樣品中的DNA(orcDNA)的起始濃度進行定量的方法。
       
        與傳統PCR一樣,反應在溫度模塊里循環進行;理論上每經過一個循環目的基因的數量都會增加一倍;每個循環結束后,定量PCR儀器通過不同的濾光片記錄熒光信號;在擴增過程中,熒光信號隨著PCR產物的增加而增強。
       
        PCR系統存在典型的4個階段,分別是基線期,指數增長期,線性增長期和平臺期。
       
        PCR系統各組注意事項:
       
        1.實驗室分區:樣品處理區、PCR反應制備區、擴增區;
       
        2.標準品的稀釋使用獨立的一套移液器;
       
        3.標準品的稀釋液中含有CarrierRNA;
       
        4.移液器使用帶濾芯的吸頭;
       
        5.先陰性對照樣,后加樣品,再加低濃度標準品,后加陽性對照;
       
        6.PCR管上不可用記號筆標記;
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